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DSN
(熱穩定核酸酶)
鎖定
DSN,全稱為duplex-specific nuclease,中文譯名雙鏈特異性核酸酶,是一種熱穩定核酸酶,用於構建均一化cDNA。
- 中文名
- 雙鏈特異性核酸酶
- 外文名
- duplex-specific nuclease
- 縮 寫
- DSN
- 用 途
- 構建均一化cDNA
- 優 點
- 需要材料較少, 有好的應用前景
DSN是一種熱穩定核酸酶的縮寫 。該酶能夠選擇性降解雙鏈 DNA 和 DNA-RNA 雜交體中的 DNA,但對單鏈核酸分子幾乎沒有作用,可以用於構建均一化cDNA。 Zhulidov et al首次把將 DSN 用於全長 cDNA 的均一化文庫構建, 併成功地構建了美國加州海兔(Aplysiacalifornica)神經組織的均一化全長 cDNA 文庫。
DSN 均一化法也是基於 DNA 復性動力學原理,通過控制 DNA 變性和復性(雜交)條件,利用特異降解雙鏈 DNA 的酶 DSN,降解雜交過程中形成的雙鏈 DNA。高丰度的基因形成雙鏈的速度較快,所以降解也比較多, 從而達到均一化的目的。 DSN 法簡便,耗時短。利用本方法能夠達到的均一化程度為:高丰度基因的丰度降低1~2 個數量級, 中丰度的降低幾倍或保持不變,低丰度的丰度增長不超過 3 倍。由於基於 DNA 復性動力學原理,不同組織來源的同源基因也可能被 DSN 酶降解,造成此類基因大幅度減少,這是基於DNA 復性動力學原理的均一化法不能克服的問題。 同其他常用的均一化技術相比,基於 DSN 的均一化技術操作步驟簡單, 所需要的起始材料也比較少, 具有較好的應用前景。
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