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預雜交
鎖定
預雜交是將固定於載體膜上的DNA片段與DNA探針進行雜交之前的試驗處理過程,是Southern印跡雜交中的一個重要的步驟。DNA探針在與結合於載體膜上的DNA片段雜交的同時同樣能夠結合於載體膜上,既消耗了DNA探針,也嚴重地降低了背景的反差。因此,在進行雜交前,必須將載體膜上所有能與DNA結合的部位全部封閉,這一過程稱為預雜交。
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- 中文名稱
- 預雜交
- 英文名稱
- prehybridization
- 定 義
- 在分子雜交實驗之前對雜交膜上非樣品區域進行封閉,用以降低探針在膜上的非特異性結合。封閉試劑成分主要是大量的非同源性的核酸或蛋白質等。
- 應用學科
- 生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
以上內容由全國科學技術名詞審定委員會審定公佈
- 中文名
- 預雜交
- 外文名
- prehybridization
- 含 義
- 將固定於載體膜上的DNA片段與DNA探針進行雜交之前的試驗處理過程,是Southern印跡雜交中的一個重要的步驟
預雜交的基本方法是將轉印後的載體膜置於預雜交液中,預雜交液不含探針,主要成分為商品化的鮭魚精子DNA、酪蛋白或牛血清等,這些大分子可非特異性與載體膜空白部位結合即封閉載體膜再次與DNA的結合能力,以保證雜交的特異性。
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