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電泳遷移率變動分析

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用放射性同位素標記待檢測的片段（即探針DNA），然後與細胞提取物共温育，形成DNA-蛋白複合物，將該複合物加到非變性聚丙烯酰胺凝膠中進行電泳。
中文名
電泳遷移率變動分析
外文名
electrophoretic mobility shift assay
別    名
凝膠阻滯實驗
類    型
分析方法
實驗方法
用32P標記DNA分子

目錄

  1. 1 定義
  2. 2 實驗方法
  3. 3 應用

電泳遷移率變動分析定義

電泳遷移率變動分析，又稱凝膠阻滯實驗，英文名electrophoretic mobility shift assay，簡稱EMSA。是體外利用電泳遷移率的變化來分析DNA與蛋白質相互作用的一種特殊的凝膠電泳技術。 [1] 

電泳遷移率變動分析實驗方法

通常用32P標記DNA分子，而不標記蛋白質。電泳結束後，用放射自顯影技術顯現具放射性標記的DNA條帶位置。如果細胞蛋白提取物中不存在與同放射性標記的DNA探針結合的蛋白質，那麼所有放射性標記都將出現在凝膠的底部；反之，將會形成DNA-蛋白質複合物，由於受到凝膠阻滯的緣故，放射性標記的DNA條帶就會出現在凝膠的不同部位。 [1] 

電泳遷移率變動分析應用

  1. 用於研究特定的轉錄因子以及轉錄因子所結合的順勢作用元件。 [1] 
  2. 用於研究與蛋白質相結合的DNA的序列的特異性。
  3. 評估突變對探針DNA與結合蛋白相互作用的影響。 [1] 
  4. 用於研究DNA-foot printing。
參考資料
  • 1.    朱玉賢．現代分子生物學．北京：高等教育出版社，2007年11月