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電泳分離
鎖定
- 中文名
- 電泳分離
- 外文名
- Electrophoretic separation
電泳分離影響電泳分離的主要因素
電泳分離電場強度
電場強度是指每釐米距離的電壓降,又稱為電位梯度或電勢梯度。電場強度對顆粒的泳動速度起着十分重要的作用。電場強度越高,帶電顆粒的泳動速度越快。根據電場強度的大小可將電泳分為高壓電泳和常壓電泳。常壓電泳的電場強度一般為2~10V/cm,電壓為100~500V,電泳時間從幾十分鐘到幾十小時,多用於帶電荷的大分子物質的分離;高壓電泳的電場強度為20~200V/cm,電壓大於500V,電泳時間從幾分鐘到幾小時,多用於帶電荷的小分子物質的分離。
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電泳分離溶液的pH
溶液的pH決定了溶液中顆粒分子的解離程度,也就是決定了顆粒分子所帶淨電荷的多少。對於兩性電解質而言,溶液的pH不僅決定顆粒分子所帶電荷的種類,而且決定淨電荷的數量。溶液的pH離其等電點越遠,顆粒所帶淨電荷越多,泳動速度越快;反之,顆粒的泳動速度則慢。當溶液的pH等於某溶質的等電點時,其淨電荷為零,泳動速度也等於零。因此,電泳時溶液的pH應該選擇在適當的數值,並需採用緩衝液使pH維持恆定。
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電泳分離溶液的離子強度
電泳分離電滲
在電場中,溶液對於固體支持物的相對移動稱為電滲。例如,在紙電泳中,由於濾紙纖維素上帶有一定量的負電荷,使與濾紙相接觸的水在電場中,液體對於固體支持介質的相對移動稱為電滲現象。由於電泳支持介質表面可能會存在一些帶電基團,如濾紙表面通常有一些羧基,瓊脂可能會含有一些硫酸基,而玻璃表面通常有Si-OH基團等等。這些基團電離後會使支持介質表面帶電,吸附一些帶相反電荷的離子,在電場的作用下向電極方向移動,形成介質表面溶液的流動。在pH>3時,玻璃表面帶負電,吸附溶液中的正電離子,使玻璃表面的溶液層帶正電,在電泳中向負極遷移,帶動電極液產生向負極的電滲流。如果電滲方向與待分離分子電泳方向相同,則加快電泳速度;反之,則降低電泳的速度。
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