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雙縮脲試劑
鎖定
雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲，由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此也能與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應。當底物中含有肽鍵時，試液中的銅與多肽配位，絡合物呈紫色。可通過比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑑定反應的靈敏度為5-160mg/mL。
- 中文名
- 雙縮脲試劑
- 外文名
- Biuret Reagent
- 應 用
- 檢測含肽鍵的物質，包括雙縮脲，蛋白質等
- 相關反應
- 雙縮脲反應
- 製 作
- 0.1g/mL氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.01g/mL硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製而成
雙縮脲試劑配製
雙縮脲試劑A是質量分數為0.1g/mL的NaOH水溶液；
雙縮脲試劑B是質量分數為0.01g/mL的CuSO4水溶液.
先在待測液中加入雙縮脲試劑A 3mL，振盪均勻（營造鹼性環境），再加入1～2滴雙縮脲試劑B，振盪均勻。如果待測液裏含有蛋白質，那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。
蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與Cu2+絡合成紫色的絡合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。
雙縮脲試劑注意事項
在使用雙縮脲試劑時候，必須注意，必須是先加0.1g/mL氫氧化鈉溶液，再加0.01g/mL硫酸銅的水溶液。若先加入硫酸銅溶液，再加入氫氧化鈉溶液，則無法充分製造鹼性環境，此時CuSO4會與NaOH發生複分解反應，生成藍色氫氧化銅沉澱，導致現象不清，無法較好地達到實驗目的
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雙縮脲試劑與雙縮脲區別
雙縮脲（NH2CONHCONH2）是兩個分子脲經180℃左右加熱，放出一個分子氨後得到的產物。
雙縮脲試劑是由雙縮脲試劑A和雙縮脲試劑B兩種試劑組成。
雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1g/mL的水溶液；
雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數為0.01g/mL的水溶液。
雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在，遇蛋白質產生紫色。
簡單的説，雙縮脲是一種化學物質，而檢測蛋白質用的那兩個試劑之所以叫雙縮脲試劑，是因為檢測原理和雙縮脲的形成相似。
雙縮脲試劑方法學評價
優點：雙縮脲法測定蛋白質的測定範圍是1~10mg蛋白質，操作簡單、快捷。既適合手工操作，又適合自動化分析，重複性好、線性關係好， 雙縮脲試劑可以長期保存（ 若貯存瓶中有黑色沉澱出現，則需要重新配製）。
