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配基
鎖定
配基就是親和層析的核心物質,在分離中起特異性吸附與分離物的作用。
- 中文名
- 配基
- 種類1
- 天然配基
- 種類2
- 染料配基
- 種類3
- 氨基酸類親和配基
配基分類
配基一般分為天然配基(包括糖結合配基和蛋白質結合配基)、染料配基、氨基酸類親和配基、核苷酸及核苷酸類似物配基和仿生配基等幾類。其中利用計算機輔助設計的仿生配基 和膜層析 代表了親和層析的發展方向。不僅是配基本身的結構,它們與載體的連接方法也與層析的分離能力有關 影響因素與洗脱 親和層析中配基與欲分離物吸附作用的大小主要與配基的空間結構有關,因此可以用分子間相互作用的平衡常數K D 來衡量親和作用強度 但它們的結合力仍不外乎對應的功能基團之間的氫鍵、靜電作用、疏水作用等。所以,除了可改變配基以改變親和層析的作用強度以外,還可以通過改變pH和離子強度的方法來改變配基與生物大分子之間的親和力,從而達到洗脱的目的 但由於親和層析的多樣性,洗脱的條件常常需要通過實驗來獲得。除此以外,還可運用其它配基、抑制劑等物質與出層析劑上的配基或生物大分子產生競爭性結合,達到洗脱的目的,這種方法被稱為專一性洗脱。專一性洗脱可以獲得很高的分辨能力,但洗脱劑的價格較高,所以常與普通洗脱配合使用。值得注意的是,在洗脱時,會有少許配基與蛋白質一同被洗脱下來,因此常在其後加一凝膠層析以除去小分子的配基。4.4 應用及舉例 在實際使用中,配基與欲分離蛋白質之間的親和力要控制在一定的範圍之內,這是因為若親和力太低,則分離的效果不好;若親和力太高,則洗脱太困難。因此配基與欲分離蛋白質之間的K D 值一般控制在10 -4 ~10 -6 之間
配基配體
在生物化學領域
配體(ligand,也稱為配基)是一個化學名詞,表示可和中心原子(金屬或類金屬)產生鍵結的原子、分子和離子。一般而言,配體在參與鍵結時至少會提供一個電子。配體扮演路易斯鹼的角色。但在少數情況中配體接受電子,充當路易斯酸。
一般配體可依其帶電、大小、可提供電子數及其原子特性加以分類。
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