豬鏈球菌致病分子基礎與防控技術

《豬鏈球菌致病分子基礎與防控技術》系統總結了作者及其團隊近15年來圍繞豬鏈球菌致病與防控展開的科研工作及取得的系列成果，揭示了豬鏈球菌病的流行病學規律、耐藥特徵及致病分子機制，鑑定了一批豬鏈球菌新的毒力相關因子，並在此基礎上開發了一系列豬鏈球菌病的新型疫苗和診斷試劑。《豬鏈球菌致病分子基礎與防控技術》共八章，主要內容包括豬鏈球菌病的流行病學、豬鏈球菌毒力基因篩選技術、毒力相關因子的功能研究、炎症與免疫、豬鏈球菌分子靶標的鑑定、豬鏈球菌病診斷新技術、豬鏈球菌病新型疫苗及免疫預防等。

序

前言

第一章 豬鏈球菌病 1

第一節 豬鏈球菌病概述 1

第二節 豬鏈球菌病原學特徵及臨牀表現 3

一、豬鏈球菌形態特徵 3

二、豬鏈球菌培養特徵 3

三、豬鏈球菌蘭氏（Lancefiled）分羣特徵 4

四、豬鏈球菌血清型特徵 4

五、豬鏈球菌病的臨牀表現 5

第三節 豬鏈球菌與其他病原的混合感染 6

一、豬鏈球菌與流行菌（毒）株混合感染現狀 6

二、豬鏈球菌與H1N1豬流感病毒混合感染的分子機制 11

參考文獻 15

第二章 豬鏈球菌病的流行病學 18

第一節 豬鏈球菌病的流行病學特徵 19

一、血清型分型 19

二、基因型分型 20

第二節 豬鏈球菌全基因組測序與比較基因組學研究 25

一、豬鏈球菌泛基因組學研究 25

二、豬鏈球菌比較基因組學研究 28

第三節 豬鏈球菌的耐藥性及耐藥分子特性 31

一、豬鏈球菌耐藥譜 31

二、豬鏈球菌的耐藥分子機制 34

參考文獻 44

第三章 豬鏈球菌毒力基因篩選技術 46

第一節 毒力基因篩選 46

一、體內誘導抗原技術篩選毒力基因 47

二、差異蛋白質組學篩選豬鏈球菌致病相關基因 49

第二節 鑑定黏附相關毒力因子新技術的開發 51

一、ACSP技術的建立與篩選 52

二、候選SIP的驗證 54

參考文獻 57

第四章 毒力相關因子的功能研究 60

第一節 黏附因子功能研究 60

一、HP0197蛋白 61

二、澱粉酶結合蛋白B（Abpb）基因 69

三、M13金屬多肽酶SsPepO 71

四、其他黏附相關毒力因子 72

第二節 免疫逃避因子相關功能研究 75

一、IgA1蛋白酶 75

二、IgG結合蛋白 78

三、其他免疫逃避途徑 80

第三節 豬鏈球菌誘導過度炎症的分子機制 88

一、豬鏈球菌2型促炎蛋白作用機制 89

二、樹突狀細胞促進豬鏈球菌炎性風暴機制的研究 110

第四節 轉錄調控相關因子功能研究 114

一、雙組分信號轉導系統resS-resR 115

二、雙組分信號轉導系統NisKR和BceRS 116

三、雙組分信號轉導系統CiaRH 117

四、雙組分信號轉導系統1910HK/RR 118

五、轉錄調節因子CodY 119

六、Spx調節因子 121

參考文獻 122

第五章 炎症與免疫 125

第一節 宿主應答豬鏈球菌感染的基因篩選 126

一、豬鏈球菌2型感染豬脾臟的轉錄組學研究 126

二、豬鏈球菌2型感染宿主豬的轉錄組學研究 128

第二節 TREM-1在豬鏈球菌2型感染中的作用及機制研究 131

一、TREM-1在豬鏈球菌2型感染中的作用及其應答機制的研究 131

二、鼠TREM-1相互作用蛋白的篩選和鑑定研究 135

三、Actin激活TREM-1信號通路的研究 137

第三節 S.suis誘導中性粒細胞胞外誘捕網形成和逃避殺菌效應及其機制的研究 139

一、NETs在S.suis感染中的功能研究 139

二、S.suis逃避NETs殺菌效應的機制研究 141

三、S.suis誘導NETs形成機制的初步研究 144

第四節 表皮生長因子受體在豬鏈球菌2 型致腦膜炎過程中的作用及機制研究 147

參考文獻 155

第六章 豬鏈球菌分子靶標的鑑定 158

第一節 豬鏈球菌2型免疫原性蛋白的篩選和鑑定 158

一、免疫蛋白質組學簡介 158

二、豬鏈球菌免疫原性蛋白鑑定 159

三、免疫原性蛋白的表面定位 162

四、免疫原性蛋白的體內表達 162

第二節 應用比較蛋白質組學鑑定體內誘導抗原 162

一、體內誘導抗原的鑑定 162

二、體內誘導抗原表達的驗證 163

第三節 利用反向疫苗學發掘保護性抗原 164

一、反向疫苗學研究策略 164

二、反向疫苗學方法鑑定抗原保護效力 165

第四節 保護性抗原的特性分析 167

一、保護性抗原HP0197特性分析 167

二、保護性抗原HP1036特性分析 167

三、保護性抗原Enolase特性分析 168

四、保護性抗原HP0272特性分析 168

五、細胞膜相關蛋白SSU0434特性分析 168

六、細胞膜相關蛋白SSU0482特性分析 168

七、細胞膜相關蛋白SSU1853特性分析 169

八、細菌保守性抗原6-磷酸葡萄糖脱氫酶（6PGD）的特性分析 170

九、保護性抗原提供高效保護效力的機制分析 170

參考文獻 171

第七章 豬鏈球菌病診斷新技術 172

第一節 豬鏈球菌2型抗體膠體金檢測方法 172

一、莢膜多糖抗原的製備 172

二、膠體金的製備與試紙條組裝 173

三、膠體金試紙條效果的檢測 174

第二節 豬鏈球菌PCR檢測方法 176

一、PCR擴增條件的優化 176

二、PCR檢測方法敏感性與可靠性的驗證 178

第三節 豬鏈球菌2型分泌核酸酶A（SsnA）的鑑別診斷方法 180

一、SsnA重組蛋白的表達純化 181

二、SsnA蛋白ELISA方法的初步建立 182

第四節 豬鏈球菌2型基因缺失疫苗ΔGlnA/ECE1開發及其鑑別診斷分子標識的研製 183

第五節 豬鏈球菌2型ELISA抗體檢測試劑盒 185

一、莢膜多糖抗原的製備及檢測 185

二、ELISA反應條件的摸索 185

三、試劑盒其他試劑的製備及半成品檢驗 188

參考文獻 190

第八章 豬鏈球菌病新型疫苗及免疫預防 191

第一節 豬鏈球菌病三價滅活疫苗 191

一、生產用菌株的選擇和確定及菌種的毒力標準 192

二、菌種的保存及使用代次 198

三、疫苗的安全檢驗 201

四、疫苗免疫效力研究 201

五、疫苗的保存期 203

第二節 豬鏈球菌病-副豬嗜血桿菌病二聯亞單位疫苗 204

一、生產用抗原的選擇和確定 205

二、菌種的毒力標準 207

三、製備疫苗菌種的保存及使用代次 208

四、疫苗的安全檢驗 208

五、疫苗免疫效力研究 209

六、疫苗的保存期 214

第三節 豬鏈球菌2型弱毒活疫苗 215

一、豬鏈球菌弱毒疫苗菌株的篩選 215

二、豬鏈球菌2型生物學特性鑑定 217

三、豬鏈球菌弱毒菌株毒力返強試驗研究 222

四、豬鏈球菌病活疫苗安全性試驗 227

五、豬鏈球菌病活疫苗產品的保存期試驗 228

第四節 豬鏈球菌-豬霍亂沙門氏菌三聯基因工程疫苗研究 229

一、重組菌株的構建與鑑定 229

二、重組菌株免疫小鼠的攻毒保護效力試驗 232

參考文獻 235

附錄 236

附錄1 發表論文目錄 236

附錄2 獲得專利及獎勵 242

一、主要科技獎勵 242

二、其他主要獎勵和榮譽 242

三、獲得新獸藥註冊證書3項，並實現產業化 242

四、獲授權國家專利12項，其中發明專利10項 242

附錄3 術語表 244 ^[1]