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蛋白纯化层析系统

用于生物分子分离纯化的实验仪器设备
蛋白纯化层析系统是通过凝胶过滤、离子交换、疏水层析等方法分离纯化生物分子的实验装置。该系统采用模块化设计,核心组件包含微量柱塞泵、紫外检测器和电导检测器,最高承压达3500psi,流速范围覆盖0.01-10ml/min [3]。截至2020年,该系统已应用于天然蛋白质、重组蛋白、病毒等物质的制备,服务场景涵盖科研实验与中试生产。浙江大学医学院的设备数据显示,单台仪器累计服务时长超2000小时,完成近900次实验操作 [1]
生产厂商
BioRad [1-2]
流速范围
0.01-10ml/min [3]
检测波长
190-700nm [3]
服务模式
时间预约制 [1]
购置时间
2017年10月1日(部分机型) [1-2]
适用领域
生物学、基础医学、临床医学、预防医学与公共卫生学 [1] [3]

技术原理

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系统基于不同生物分子的物理化学特性差异实现分离,包含五类层析方法:
  • 凝胶过滤层析:根据分子量差异分离蛋白质复合物
  • 离子交换层析:利用蛋白质表面电荷分布进行选择性吸附
  • 疏水层析:通过疏水相互作用纯化膜蛋白等特殊结构分子
  • 反向层析:采用高疏水性填料分离小分子肽链
  • 亲和层析:依靠特异性配体结合目标蛋白质

设备组成

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核心模块包含双层析泵系统与多检测器组件,标准配置包括:
  • 紫外检测器:波长调节范围190-700nm,检测灵敏度达0.00001AU
  • 电导检测器:测量范围0.001-500mS/cm,支持pH值动态监测
  • 高压混合器:配备263μl与750μl两种规格适配不同实验需求
  • 低温分部收集器:保持4℃环境确保样品活性,兼容12-18mm收集管 [3]

应用领域

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该系统在医学与生物学领域主要用于:
  • 重组蛋白药物纯化工艺开发 [3]
  • 病毒载体分离及滴度提升 [3]
  • 抗体亲和力筛选与结构解析 [3]
  • 质粒DNA大规模制备 [3]
  • 天然产物活性成分提取 [3]

使用管理

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根据浙江大学医学院的运营记录(截至2018年4月):
  • 实行预约培训制度,用户需通过资格评定方可独立操作
  • 层析柱等耗材需实验人员自备
  • 收费标准按院内(25元/小时)、校内(40元/小时)、校外(60元/小时)分级设定
  • 单台设备年服务量超200机时,故障率低于5% [1-2]

技术演进

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2017年购置的第四代机型新增功能:
  • 全自动阀切换系统减少人工干预
  • 在线缓冲液配置模块提升实验效率
  • 数据追溯功能满足GMP合规要求
  • 混合器耐压性能提升至23.3MPa [3]

典型参数

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以Biologic DuoFlow机型为例:
  • 工作压力:最高3500psi(23.3MPa)
  • 温度控制:收集室恒温4±0.5℃
  • 进样精度:±1%流速波动率
  • 检测线性:紫外检测器在0.0001-2AU范围内R²>0.999
  • 系统滞留体积:小于500μl [3]