精液分析儀

精液分析是判斷和評估男性生育能力最基本和最重要的檢驗方法，精子的密度、活動力、活動率和存活率的綜合分析是瞭解和評估男性生育能力的依據。國內大部分醫院採用計算機輔助精液分析儀（CASA）進行精液常規分析，CASA是計算機技術和圖像處理技術結合發展起來的一項精液分析技術，提高了精液檢查結果的準確性。精液分析在男性不育症的治療、男性節育措施的效果評價及男性生殖生理研究中具有不可替代的作用。

計算機輔助精液分析儀由硬件系統和軟件系統組成。

1.硬件系統

1)顯微攝像系統：由顯微鏡及CCD（電荷耦合器件Charge Coupled Device ）組成，可以將標本信號通過顯微放大由CCD傳輸到計算機。

2)圖像採集系統：由圖像卡構成，其功能是對CCD信號進行抓拍、識別、預處理後，將成熟信號輸送到計算機。

3)恆温系統：由加温和保温設備組成，加温是通過熱吹風機不斷將適宜的温度熱風鼓入封閉保温罩內，提供穩定、可靠的檢查環境。

4)計算機系統：對圖像信號進行全面系統的加工處理，對獲得的數據進行輸出和存儲。

2.軟件系統

採用專用的精子質量分析軟件，利用現代化的計算機識別技術和圖像處理技術，對精子的動靜態特徵進行全面的量化分析，對精子的密度、活力、活率、運動軌跡等特徵進行定量的檢測分析。

以灰度識別CASA為例，採用高分辨率的攝影技術與顯微鏡結合，精液標本液化後吸入計數池，通過顯微鏡放大後，用圖像採集系統獲取精子動、靜態圖像後輸入計算機。根據設定的精子大小和灰度、精子運動位移及運動參數，對採集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特徵等幾十項檢驗項目動態分析，由計算機處理後，打印出“精液分析檢查報告以及精子動態特徵分佈圖”。一次能對1000個精子進行動態檢測分析,2～3分鐘集合完成檢測。精液分析儀流程如圖1所示。

CASA精子運動分析參數主要分為三類，其具體參數及其含義如表1所示。

1.運動精子密度參數：前向運動精子密度、前向運動率、活動率。

2.精子活動參數：平均跨徑速度、軌跡速度、直線運動、鞭打頻率。

3.精子運動方式參數：直線性、前向性、精子側擺幅度、擺動性、平均移動角度。

表1 精液分析儀主要參數及其含義

臨牀採用的計算機輔助精液分析儀主要有灰度識別CASA和熒光染色CASA，兩種CASA與傳統精液分析法的性能比較如下。

1.灰度識別CASA

優點：

1）客觀、高效、高精度。

2）提供精子動力學參數的量化數據。

3）容易實現標準化和實施質量控制。

缺點：

1）人為設定顆粒大小和灰度，易受其他細胞影響。

2）根據位移確定活動精子，不能區分“死精子”和“活精子”。

3）缺乏對精子羣體的瞭解，對畸形精子識別存在缺陷。

4）受密度影響。

2.熒光染色CASA

優點：

1）準確區分“死精子”和“活精子”。

2）不同的熒光染色，可進行多項檢查。

3）提供精子動力學參數量化數據，更容易實現標準化和實施質量控制。

缺點：

1）熒光染劑，操作不當影響精子活力分析且造成檢查成本增加。

2）缺乏對精子羣體的瞭解，對畸形精子識別存在缺陷。

3.傳統精液分析

優點：WHO推薦顯微鏡手工法檢查精子密度、精子活動率和活動力.。

缺點：依賴於檢驗者的經驗和主觀判斷，檢查結果不易標準化和質量控制 ^[1]  。

1.樣品製備是CASA取得高質量檢查結果的關鍵，CASA採用深度為10um樣品池，能保證精子在單層界面內自由運動，取樣分析前標本必須充分混勻。

2.保證計數池的潔淨性，不潔淨的計數池可影響精子的活力，尤其影響灰度CASA精子計數的準確性。

3.精子樣品密度過大時，造成圖像處理上的粘連，無法分析每個精子的運動特性，精液中所含精子太少時，需增加檢査視野數量或者使用低倍物鏡觀察，以提高樣品檢出率。

4.儀器使用前精液必須液化完全，無精子症和不液化精液不適用於儀器檢查。

1.視頻窗口無圖像 視頻連接不良或CCD故障，或“視頻設置”中“亮度”和“對比度”設置過低，可通過檢查CCD電源指示燈或重新連接視頻線解決。

2.圖像模糊不清 物鏡鏡頭被污染或聚光鏡太高，可用無水乙醇擦拭物鏡鏡頭，適當調整聚光鏡位置解決。

3.不能打印檢查報告 檢查打印機數據線與計算機連接，打印機驅動文件是否錯誤或墨盒需要更換，可重新連計算機與打印機的連接線或重新添加打印機程序 ^[2]  。