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等電聚焦技術

鎖定
等電聚焦技術是20世紀60年代建立起來的一種蛋白質分離分析手段，是當前單向電泳中具有較高分 辨率的電泳技術。IEF的基本原理是，利用 蛋白質分子或其他兩性分子等電點的不同， 在個穩定的、連續的、線性的pH梯度中，進行蛋白質的分離和分析。蛋白質在不 同的pH環境中帶不同數量的正電或負電， 一種蛋白質只在某一pH時，其靜電荷為 零，這一pH即為該種蛋白質的等電點。 [1] 
蛋白質的等電點決定於它的氨基酸組成和構象，是一個物理化學常數。IEF是由兩性電解質作用形成的pH濃度梯度凝膠中進行的，蛋白質分子在梯度pH支持介質中泳動，隨着支持介質中pH值的變化，淨電荷逐漸減少，泳動速度逐漸下降，當泳動到pH值為等電點處時，蛋白質分子的淨電荷為0，遷移速度為0，此時，稱為聚焦。因此，IEF是根據等電點的差別分離蛋白質的，與蛋白質的分子量無關。（王保捷）
參考資料
  • 1.    官大威．法醫學辭典：化學工業出版社，2009年