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競爭性抑制劑
鎖定
競爭性抑制劑概念解析
如果抑制劑濃度恆定,則在低底物濃度([S])時抑制作用最為明顯,增大[S],抑制作用隨之降低,直到[s]增大至很濃時,抑制作用近於消失,達到未加抑制劑時的最大反應速度(Vmax)水平,其動力學特徵是:表觀反應常數(Km)增大、Vmax不變。抑制程度只與抑制劑濃度有關。
競爭性抑制劑結構特徵
競爭性抑制劑雙倒數方程
以此方程所作曲線和各參數的值如圖1所示:
競爭性抑制作用Ki的求解方法
①從雙倒數圖計算出表觀米氏常數Kmapp,然後代入Kmapp=Km(1+[I]/Ki)可計算出Ki。
②從雙倒數圖求得各I濃度下的Kmapp值對相應[I]再作圖,從再製圖的縱截距可直接測得Km,從其橫截距可直接測得Ki。
③從不同固定[I]下所作一簇直線的斜率1/S對相應[I]再製圖,其縱截距為Km/Vmax,斜率為Km/VmaxKi,橫截距即為-Ki。
競爭性抑制劑
④Dixon作圖法求Ki值
競爭性抑制劑計算公式
首先由此查看有關IC50的定義。它的值取決於實驗所用的酶和底物濃度,當酶的濃度固定時,IC50值與Ki、Km和 競爭性抑制劑
根據該方程式,當底物濃度大於Km值時,IC50值高於Ki值,尤其當底物濃度較高時,Ki值偏低更加明顯。
競爭性抑制劑的米氏方程亦可寫為v=Vmax[S]/(Km(1+[I]/Ki)+[S])