植物組織培養實驗指導

植物組織培養技術是一門現代生物技術，是植物基因工程實驗和細胞工程實驗的基礎和關鍵技術之一，具有非常強的實用性和廣泛的需求。植物組織培養課程是農林、園藝、生物類院校的林學、園藝學、農學、植物學、生物學、生物科學、生物技術、草業科學、植物保護、藥學等專業的本科生和研究生的必修課程，也是高職類院校有關專業的必修課程，以及園林花卉生產企業的培訓教材。植物組織培養是一門實踐性極強的動手操作的技術課程，其實驗課的重要程度可想而知，因此，有必要針對該課程的特點，着力加強實驗動手能力培養，為此我們撰寫了植物組織培養實驗課程，以期為廣大讀者提供非常好的實踐機會和動手能力培養的平台。

在植物組織培養課程教學中深感有關實驗課指導書籍和資料的缺乏，難以滿足植物組織培養實驗教學的需要，為此，在2000年組織編寫了北京林業大學校內教材《植物組織培養實驗指導手冊》，並在教學實踐中，根據實驗課上學生的反饋信息於2005年和2008年先後進行了補充和修訂，形成了一套較為完善的實驗課指導教材，在多年的實驗課教學中受到學生們的好評。為了更好地發揮該教材的作用，我們申請了國家林業和草原局普通高等教育“十三五”規劃教材立項，並幸運地得到了學校資助。

《植物組織培養實驗教程（國家林業和草原局普通高等教育“十三五”規劃教材）》編者來自國內農林院校具有多年從事植物組織培養教學和學術研究的經歷，積累了較為豐富的相關經驗。同時，參考了相關植物組織培養實驗指導書籍和文獻資料，吸收借鑑了有關實驗指導教材的優秀內容，儘可能豐富本課程的實驗內容，以期為不同院校開設植物組織培養實驗課時有更多的可供選擇的實驗。另外，還針對農林行業的教學和實踐需求，儘可能地選擇木本植物為實驗材料，具有鮮明的林業行業特色。

《植物組織培養實驗教程（國家林業和草原局普通高等教育“十三五”規劃教材）》共52個實驗，每個實驗都詳細介紹了實驗目的、實驗原理、實驗用具及藥品、實驗材料、實驗方法及步驟、注意事項、作業及思考題等。 ^[1] 

前言

實驗1 植物組織培養實驗室佈局與主要設備

實驗2 植物組織培養主要儀器設備及功能

實驗3 植物離體培養基本操作技術

實驗4 培養基母液的配製（MS培養基）

實驗5 培養基製備與滅菌

實驗6 過濾滅菌及其他培養基準備

實驗7 木本植物外植體採集與處理

實驗8 外植體接種

實驗9 外植體表面滅菌的完全隨機區組試驗設計

實驗10 繼代、分化和生根培養

實驗11 生根培養的正交設計

實驗12 試管內微嫁接技術

實驗13 試管外生根技術

實驗14 生根試管苗的煉苗馴化

實驗15 試管苗移栽技術

實驗16 植物組織培養中的污染與控制

實驗17 植物組織培養中的玻璃化發生與克服

實驗18 植物組織培養中的褐化與克服

實驗19 植物愈傷組織的誘導和培養

實驗20 不同外植體材料愈傷組織誘導的配對法設計

實驗21 植物愈傷組織的懸浮培養

實驗22 懸浮細胞繼代培養及細胞平板培養

實驗23 顯微鏡直接計數法

實驗24 植物細胞生長量的測定（一）

實驗25 植物細胞生長量的測定（二）

實驗26 植物細胞活力的測定

實驗27 細胞株系的篩選

實驗28 細胞看護培養技術

實驗29 細胞微室培養技術

實驗30 植物細胞培養合成次生代謝產物的調節

實驗31 原生質體的分離和培養

實驗32 聚乙二醇（PEG）方法誘導原生質體融合

實驗33 電融合方法誘導柑橘原生質體融合

實驗34 植物微莖尖脱毒技術

實驗35 植物超低温脱毒技術

實驗36 花粉發育時期的鑑定

實驗37 花葯離體培養

實驗38 植物幼胚離體萌發培養

實驗39 蘋果胚乳培養技術

實驗40 葡萄的胚珠培養

實驗41 離體授粉受精

實驗42 人工種皮的製備

實驗43 試管苗保存技術

實驗44 超低温冷凍保存種質

實驗45 葉片再生實驗

實驗46 植物遺傳轉化

實驗47 基因槍法轉化黑穗醋栗

實驗48 花粉管通道法介導桃樹基因轉化

實驗49 轉基因植株基因組DNA的提取

實驗50 轉基因植株PCR鑑定

綜合實驗一 木本植物組織培養快繁體系的建立

綜合實驗二 農桿菌介導的遺傳轉化技術體系的建立

參考文獻

附錄

附錄1 植物組織培養常用培養基配方（mg/L）

附錄2 培養基中常用化合物相對分子質量

附錄3 常用英文縮寫

附錄4 植物組織培養常用的熱不穩定物質

附錄5 常用緩衝溶液的配製

附錄6 常用酸鹼摩爾濃度的近似配製表

附錄7 常見植物生長調節劑及主要性質

附錄8 常見植物生長調節劑單位換算

附錄9 常見植物生長調節劑配製和貯存

附錄10 培養基植物生長調節劑濃度換算表

附錄11 温濕度換算表

附錄12 細胞篩孔徑（μm）與目數換算表

附錄13 常見抗生素的配製和貯存

附錄14 YEP培養基配方

附錄15 植物水培營養液配方