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核酸雜交技術
鎖定
核酸雜交技術是一種分子生物學的標準技術,用於檢測DNA或RNA分子的特定序列(靶序列)。
- 中文名
- 核酸雜交技術
- 類 別
- 雜交技術
- 主要物質
- 聚偏氟乙烯
- 應 用
- 可對單基因遺傳病進行早期診斷
核酸雜交技術基本信息
DNA或RNA先轉移並固定到硝酸纖維素或尼龍膜上,與其互補的單鏈DNA或RNA探針用放射性或非放射性標記。在膜上雜交時,探針通過氫鍵與其互補的靶序列結合,洗去未結合的遊離探針後,經放射自顯影或顯色反應檢測特異結合的探針。
核酸雜交技術DNA印跡雜交
DNA印跡雜交(DNA blot hybridization):
1:將DNA或RNA溶液直接點樣於硝酸纖維素膜或尼農膜上(斑點或狹線印跡)
核酸雜交技術RNA印跡雜交
RNA印跡雜交(RNA blot hybridization):
核酸雜交技術斑點雜交
將少量核酸樣品點樣在硝酸纖維素濾膜上,80℃烘烤後可牢固地固定在膜上,再用探針進行雜交。尼龍膜,特別是聚偏氟乙烯(PVDF)與DNA結合力更高,堅韌、易操作。點樣可手工,也可用手工點樣品。檢測可用放射性探針自顯影或非放射性探針顯色。
核酸雜交技術原位雜交
在保持細胞形態條件下,進行細胞內雜交,顯影或顯色。可用於DNA或RNA分析。熒光原位雜交(FISH)進行染色體DNA分析可用於生物學研究的許多領域以及臨牀細胞遺傳學研究。其主要優點是不僅可以在細胞分裂的中期,而且可在分裂間期核中診斷染色體的變化。
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