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染色鏡檢
鎖定
革蘭氏染色鏡檢法是1884年由丹麥病理學家C.Gtam所創立的,此方法可將所有的細菌分G+和G-兩大類,G-菌的細胞壁中含有較多易被乙醇溶解的類脂質,而且肽聚糖層較薄,交聯度低,故用乙醇或丙酮脱色時溶解了類脂質,增加了細胞壁的通透性,使初染的結晶紫和碘的複合物易於滲出,結果細菌就被脱色,再經蕃紅復染後就成紅色。G+菌細胞壁中肽聚糖層厚且交聯度高,類脂質含量少,經脱色劑處理後反而使肽聚糖層的孔徑縮小,通透性降低,因此細菌仍保留初染性的顏色。
- 中文名
- 染色鏡檢
- 外文名
- Dyeing microscopy
- 拼 音
- rǎn sè jìng jiǎn
- 器 材
- 載玻片、接種環等
- 目 的
- 將細菌分為G+和G-兩類
- 注 意
- 脱色時間
染色鏡檢實驗器材
載玻片、接種環、酒精燈、擦鏡紙、顯微鏡。
染色鏡檢實驗步驟
(1)取乾淨的載玻片,用記號筆在其一面做好正反面標記,再在載玻片另一面中央滴上一小滴蒸餾水。
(2)將接種環在火焰上滅菌,待冷卻後,在酒精燈旁從標記的單個小菌落中取少許細菌置於蒸餾水中混勻(同時蓋好平板倒扣置於一旁),用接種環塗成直徑約1.5cm的菌膜,再在酒精燈火焰上方以鐘擺速度通過固定好細菌,待冷卻進行染色。
(3)先滴加草酸結晶紫溶液染色1~2min,再水洗;然後滴加革蘭氏碘液溶液染色1~2min,再水洗;隨後滴加95%的酒精脱色30~60s,再水洗;最後滴加稀釋的品紅進行復染30~60s,再水洗;待乾燥或吸水紙吸乾後鏡檢。
染色鏡檢注意事項
標本塗片不能太厚,若塗片較厚,應延長脱色時間,直至不在出現紫色為止。染色過程中勿使染色液乾涸。用水沖洗後,應吸去玻片上的殘水。革蘭氏染色成敗的關鍵是脱色時間。如脱色過度,革蘭氏陽性菌也可被脱色而染成陰性菌;如脱色時間過短,革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。脱色時間的長短還受塗片厚薄及乙醇用量多少等因素的影響
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- 參考資料
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- 1. 直接染色鏡檢與過氧化酶法檢測精液中白細胞的比較與評價 .中國知網[引用日期2017-11-13]
- 2. 玻片離心後革蘭氏染色鏡檢作為尿液篩檢細菌的方法 .中國知網[引用日期2017-11-13]