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抑制消減雜交
鎖定
- 中文名稱
- 抑制消減雜交
- 英文名稱
- suppression subtractive hybridization;SSH
- 定 義
- 將抑制PCR與消減雜交技術相結合的一種快速分離差異表達基因的方法。
- 應用學科
- 遺傳學（一級學科），基因組學（二級學科）
以上內容由全國科學技術名詞審定委員會審定公佈
- 中文名
- 抑制消減雜交
- 外文名
- suppression subtractive hybridization
該法既利用了消減雜交技術的消減富集，又利用了抑制PCR技術進行高效動力學富集。先將T與D方CDNA用限制酶切割為小片段，將T方平均分為2份，分別連接不同的接頭，然後與過量的D方CDNA進行不充分雜交。濃度高的單鏈分子迅速復性，而濃度低的單鏈分子仍以單鏈形式存在。然後混合兩份雜交樣品，同時加入新的變性D 方CDNA 進行第二次扣除雜交，雜交完全後補平末端，加入合適引物接頭(接頭1與接頭2 引物)進行PCR 擴增。當DNA 兩條鏈含相同接頭時，其PCR 擴增受抑制，而含不
同接頭的雙鏈DNA 分子才可進行指數擴增，其產物即為目的片段。此技術避免了消減雜交過程中分離單雙鏈DNA 的步驟，可成千倍地擴增目的片段，能分離出T 方上調錶達的基因，與DDRT-PCR 相比，具有假陽性少、重複性強的優點。它的最大不足就是需要較多的起始材料，更多地依賴於PCR 技術，且不能同時進行數個材料之間或不同處理材料之間的比較。
