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平末端

鎖定
平末端指DNA分子兩條鏈在限制性內切酶作用下斷裂的位置是處在 一個對稱結構的中心,形成的一種平齊的末端結構類型。大多數II型限制酶的識別序列都是迴文結構,即以雙對稱軸按5'—3'方向閲讀時,其鹼基順序都是相同的,所以當切割位點在對稱軸上,限制片段為平末端。具 有平齊末端的DNA可以連接,但連接效率只有黏性末端連接效率的1%。(李英碧) [1] 
中文名
平末端
定    義
DNA分子兩條鏈在限制性內切酶作用下斷裂的位置是處在一個對稱結構的中心,形成的一種平齊的末端結構類型

平末端術語介紹

當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時,切開的DNA兩條單鏈的切口,是平整的,這樣的切口叫平末端。
平末端識別序列 平末端識別序列
限制性內切酶切斷的DNA分子片段,需要一種特殊的酶——DNA連接酶來縫合,恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。E·coliDNA連接酶只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間連接起來,不能將雙鏈DNA片段平末端之間進行連接。而T4DNA連接酶既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補的黏性末端,又可以“縫合”雙鏈DNA片段的平末端,但連接平末端之間的效率比較低。

平末端相關措施

提高平末端連接效率的措施
①提高T4DNA連接酶的濃度;②提高DNA片段的濃度;③降低ATP濃度,以增強連接物與DNA結合;④加入多胺化合物,如亞精胺,降低DNA的靜電排斥力;⑤加濃縮劑,如大分子排阻物聚乙二醇PEG)、強水化物三氯化六氨鈷等。
參考資料
  • 1.    官大威.法醫學辭典:化學工業出版社,2009年