增殖區

分離、鑑定大鼠骨骺生長板增殖區軟骨細胞,克隆甲狀旁腺激素相關蛋白（PTHrp）基因並構建真核表達載體pEGFP-IRES2-PTHrp.[方法]Percoll不連續密度梯度離心法分離生長板增殖區軟骨細胞,用X型膠原抗體和電鏡鑑定,提取總RNA,RT-PCR方法獲得PTHrp基因的全長cDNA,插入pCR2.1TA克隆載體中進行序列測定,測序正確後將其亞克隆至表達載體pEGFP-IRES2.[結果]分離出增殖區軟骨細胞,經限制性內切酶酶切圖譜分析和DNA序列測定證實目的基因已插入重組質粒.[結論]準確分離增殖區軟骨細胞併成功構建了PTHrp基因的真核表達載體,為進一步揭示PTHrp的生物學功能及其在在軟骨細胞的分化和骨骼形態發生中的作用奠定了基礎.