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分子克隆技術
鎖定
分子克隆技術是在分子水平上提供一種純化和擴增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉化與轉導的方式,引入適合的寄主體內得到複製與擴增,然後再從篩選的寄主細胞內分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的基因的擴增。
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- 中文名
- 分子克隆技術
- 所屬學科
- 生物化學
這一複製過程經常被用於增加並獲取DNA片段中的基因,但也可用來增加某些任意的DNA序列,如啓動子、非編碼序列、化學合成的寡核苷酸或是隨機的DNA片斷。將DNA片段(或基因)與載體DNA分子共價連接,然後引入寄主細胞,再篩選獲得重組的克隆,按克隆的目的可分為DNA和cDNA克隆兩類。cDNA克隆是以mRNA為原材料,經體外反轉錄合成互補的DNA(cDNA),再與載體DNA分子連接引入寄主細胞。每一cDNA反映一種mRNA的結構,cDNA克隆的分佈也反映了mRNA的分佈。
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